Detection of mycotoxins and mycotoxigenic fungi

 

الكشف السريع عن العزلات الفطرية المنتجة للسموم باستعمال الأشعة فوق
البنفسجية UV light وبطول موجي 263 نانوميتر وباستعمال أوساط غذائية مختلفة هي Potato Dextrose Agar (PDA) و Yeast Extract Agar (YEA) و Coconut Agar (COA) و Czapek Dox Agar
(CDA)

تابع الملف المرفق

Mycotoxins may be produced on cereals or fodder, or in the animal diets. Some animal diets contain several
toxigenic species of mould, which may produce a number of mycotoxins having different toxic substances. The
purpose of the present review is to gather up-to-date knowledge about harmful effects and toxicity of mycotoxins.
The review is focused on the structures, toxicity, their occurrences in food and some analytical issues such as
sampling, methods for their analysis and the emerging mycotoxin detection techniques, which can be used as
simple and rapid screening tests for cost-effective control of mycotoxin and their products.

An overview is presented of the analysis of mycotoxins by rapid methods such as: enzyme linked immunosorbent
assay (ELISA); flow through membrane based immunoassay; immunochromatographic assay;
fluorometric assay with immunoaffinity clean-up column or with a solid phase extraction clean-up column;
and fluorescence polarization method. These methods are currently commercially available and are reliable,
rapid methods. This review focuses on the basic principle of each rapid method as well as advantages and
limitations of each method. Additionally, we address other emerging technologies of potential application
in the analysis of mycotoxins.

 

 

 

الكشف النوعي والكمي عن السموم الفطرية

 

اولا: الكشف النوعى:

 

1- عملية التحليل للسموم الفطرية ذو الخاصية الضوئية باستخدام مقياس ضوئي طيفي مرئي  فوق بنفسجي

 

  .(Ultraviolet VisibleSpectrophotometer) 

 

2- استخدام بخار الامونيا (هيدروكسيد الامونيوم ) للكشف عن السموم الفطرية

 

ثانيا: الكشف الكمى:

 

تقدمت أساليب الكيمياء التحليلية في السنوات الاخيرة وادخلت طرق جديدة لتحليل السموم الفطرية وكذلك استعملت في المعايرة وللتعرف على كمية أي مادة كيماوية يجب اتباع الخطوات التالية:

 

1- جمع العينات     (SAMPLING)
2- استخلاص السم من العينة (EXTRACTION) 3- التنظيف(CLEAN UP)

 

4-  التحليل (ANALYSIS)

 

       أ- عملية الفصل الكروماتوجرافى .

 

       ب- عملية الفصل المناعية .

 

       ج- طرق حديثة .
أولا: جمع العينات:

 

تكون العينات المأخوذة عشوائية ويجب الأخذ بعين الاعتبار ضرورة حفظ العينات مبردة حتى   وصولها الى المختبر وتحليلها دون أن تفقد محتوياتها من المواد السامة.

 

ثانيا: الاستخلاص:

 

تعني عزل المادة السامة من العينة وهناك طرق كثيرة للاستخلاص مثل طريقة استخدام مادة سائلة وهي الطريقة الأفضل حيث لها القدرة على اذابة المادة السامة

 

و يمكن فصله عن العينة ثم يركز هذا السائل العضوي الى حجم معقول بواسطة التبخير. ولكي يكون الاستخلاص كاملا لابد من اتباع الطريقة التالية: تضاف العينة التي تحتوي على السم على كمية معينة من المحلول العضوي الذي يراد استخلاص السم فيه ويخفق لمدة من 5- 10 دقيقة مرتين على الاقل بعدها يرشح الخليط ويؤخذ الراشح ثم تفصل الطبقة المائية بقمع الفصل.

 

ثالثا: عملية التنظيف:

 

أثناء عملية الاستخلاص قد تفصل مواد أخرى غير المادة السامة وهذا يمكن أن يؤثر على التقدير الكمي للمادة السامة لذلك يجب التخلص من هذه المواد بعملية التنظيف (clean up ) وهناك عدة وسائل لذلك ومنها:

 

التوزيع بين المحاليل باستخدام مذيبين لا يذوبان في بعضهما مثل الكلوروفورم والماء وتتم هذه العملية بواسطة قمع الفصل ثم تمزج جميعها مع العينة المستخلصة لمدة دقيقتين في القمع ثم يترك القمع ليتم الفصل الى طبقيتين الطبقة المائية والطبقة العضوية وفي أغلب الاحيان ينتقل السم الى الطبقة العضوية وتكرر هذه العلمية ثلاثة مرات حتى يتم فصل معظم المادة السامة وتتبقى كثير من المواد التي استخلصت من عملية الفصل وبخاصة تلك المحبة للماء والمتأينة في الطبقة المائية.

 

رابعا: التحليل:

 

1-  عملية الفصل الكروماتوجرافى  (Chromatography)     
تعتبر هذه العملية من أكثر الطرق شيوعا وفعالية لفصل الكيماويات وتقديرها كما ونوعا وهــــــ ي عــــــدة طـــــــــــرق منهــــــــا: .

 

 

 

*فصل الصفائح الرقيقة

 

                      (Thin layer chromatography)

 

*فصل الغاز                ( (Gas chromatography
* فصل السائل ذي الضغط العالي

 

 (High performance liquid chromatography)
وتشترك تلك الانواع السابقة من الفصل في طورين هما:

 

          أ‌-          الطور الثابت (Stationary phase) حيث تدمص (تتجمع على السطح) المادة أو الخليط من المواد عليه من الخارج.

 

        ب‌-        الطور المتحرك (Mobile phase) وهو الذي يذيب المواد الكيماوية بطرق متفاوتة ويحركها من والى الكشاف.

 

2-    عمليات الفصل المناعية

 

                         (Immunological Assays)

 

 

 

·        Enzyme linked immuno-sorbent assay(ELISA)

 

·        Membrane-based flow-through assay

 

·        Lateral flow test

 

·        Immunoaffinity column (IAC)

 

3 -  طرق حديثة

 

·        Fluorescence polarization  (FP)   

 

·        Molecularly imprinted polymers (MIPs)